產(chǎn)品名稱:膜聯(lián)蛋白ⅡIgM抗體ELISA檢測試劑盒
英文名稱:Annexin Ⅱ IgM antibody
產(chǎn)品貨號(hào):EY-E98175
產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T
產(chǎn)品保存:2-8℃,有效期6個(gè)月
主要組成成分:試劑
性狀:液體
產(chǎn)品規(guī)格:96T/48T
96T指可以做94個(gè)標(biāo)本,2個(gè)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照
48T指可以做47個(gè)標(biāo)本,1個(gè)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照
96T-84個(gè)樣本
48T-42個(gè)樣本
待檢樣本:體液,血清,血漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清液,尿液,組織勻漿,心房水標(biāo)本等等。
樣品收集、處理及保存方法
1)血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2)血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3)細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4)組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液
5)保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
注意事項(xiàng)
1)試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
2)實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
3)不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
4)使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。
5)使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
6)洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
7)底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
8)加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
9)按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
酸球菌亞種 Lactococcus lactis subsp. lactisWM35, 黑色素瘤細(xì)胞
高鹽瓊脂/鹽瓊脂/鈉瓊脂/Mannitol Salt Aga金黃色葡萄球菌的選擇性分離培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進(jìn)口
SF763(腦瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
SF9, 昆蟲卵巢細(xì)胞胚腎細(xì)胞
DTM培養(yǎng)基/DTM Medium用于食品中真菌的培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進(jìn)口
大鼠腮腺細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
枯草芽胞桿菌 Bacillus subtilis香菇 Lentinula edodes
半糖凝集素3(GAL3)重組蛋白R(shí)ecombinant Galectin 3 (GAL3)
CA46(Burkitts淋巴瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
SKOV3 [SK-OV-3], 卵巢腺細(xì)胞系蛋白銀染試劑盒
新生兒表角細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
膜聯(lián)蛋白ⅡIgM抗體ELISA檢測試劑盒多巴胺(DA)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
(NA/NE)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
維生素B2(VB2)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
黃素腺嘌呤二核苷酸(FAD)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
黃素單核苷酸(FMN)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
花生四烯酸(AA)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
前列腺素E1(PGE1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
脂氧素A4(LXA4)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
6酮前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
2,3Dinor血栓烷B2(2,3-dinor-TXB2)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑
(cAMP)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
血栓素A2(TXA2)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
肌酸酐(Cr)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
3磷酸肌醇(IP3)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
ELISA 試驗(yàn)時(shí),注意事項(xiàng)如下:
1. 正式試驗(yàn)時(shí),應(yīng)分別以陽性對(duì)照與陰性對(duì)照控制試驗(yàn)條件,待檢樣品應(yīng)作一式二份,以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。有時(shí)本底較高,說明有非特異性反應(yīng),可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。
2. 在ELISA中,進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件的選擇是很重要的,其中包括:
(1) 固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進(jìn)行篩選:用等量抗原包被,在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng),觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時(shí),要求純度要好,吸附時(shí)一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時(shí)間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時(shí)。蛋白質(zhì)包被的zui適濃度需進(jìn)行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進(jìn)行包被后,在其它試驗(yàn)條件相同時(shí),觀察陽性標(biāo)本的OD值。選擇OD值zui大而蛋白量zui少的濃度。對(duì)于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1~10μg/ml。
(3) 酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價(jià)的滴定(見酶標(biāo)記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。
(4) 酶的底物及供氫體的選擇:對(duì)供氫體的選擇要求是價(jià)廉、安全、有明顯地顯色反應(yīng),而本身無色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應(yīng)注意防護(hù)。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時(shí)間后,應(yīng)加入強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時(shí)間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入 。