高效液相色譜儀設(shè)備是近30年發(fā)展起來的一種具有高靈敏度、高選擇性的高效快速分離分析技術(shù)。它既能用于微量組分的分析測定,又能用于大量的制備分離,靈活多樣,其應(yīng)用范圍已超過其他各種分離方法,尤其在中藥樣品的分析分離方面更充分發(fā)揮它的特長,為推動該領(lǐng)域的進步和發(fā)展作出了巨大貢獻。
高效液相色譜儀設(shè)備組成
1、輸液系統(tǒng)
包括溶劑柜、真空脫氣機、溶劑混合器、高壓泵等,其中核心部分是泵;泵的作用提供足夠的驅(qū)動力使流動相通過填充緊密的色譜柱。
洗脫方式也分為兩種:
(1)等度洗脫:在同一分析周期內(nèi)流動相組成保持恒定,適合于組分?jǐn)?shù)目較少,性質(zhì)差別不大的樣品。
(2)梯度洗脫:采用兩種(或多種)不同極性的溶劑,在分離過程中按一定程序連續(xù)改變流動相的濃度配比和極性的一種洗脫模式。用于分析組分?jǐn)?shù)目多、性質(zhì)差異較大的復(fù)雜樣品。
2、進樣系統(tǒng)
把分析試樣有效地送入色譜柱進行分離。一般有自動進樣器和手動進樣器,進樣量應(yīng)不小于定量環(huán)體積的5-10倍(zui少3倍)。
3、分離系統(tǒng)
主要是色譜柱,色譜柱是一根裝滿填料的管子。色譜柱的材料有不銹鋼、塑料、玻璃等,其尺寸(內(nèi)徑、長短)不盡相同;色譜柱填料主要有硅膠基質(zhì)和聚合物基質(zhì),填料的粒徑不盡相同。
4、檢測器
對檢測器的要求:靈敏度高、重現(xiàn)性好、線性范圍寬、死體積小、對溫度及流量的變化不敏感等。主要有紫外檢測器、熒光檢測器、示差檢測器等。
示差檢測器是一種通用型檢測器,理論上可以檢測幾乎所有的化合物。其原理是基于含樣品的洗脫劑和洗脫劑二者折光指數(shù)的差異。示差檢測器受壓力變化、溫度變化、流動脈沖的影響較大,不適合進行梯度洗脫。