細胞名稱：NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Strain L]     小鼠成纖維細胞

組織來源：皮下結締組織；疏松結締組織及脂肪

培養(yǎng)條件：MEM +10% FBS

形       態(tài)：貼壁；成纖維細胞樣

背       景：1948年3月建立了NCTC clone 929(小鼠結締組織)，細胞系L的克隆。細胞系L是zui早建立的連續(xù)培養(yǎng)細胞系之一，而clone 929是zui早的克隆株。從一只100日齡的雄性C3H/An小鼠的皮下網眼狀空隙和脂肪組織中建立了親本細胞系L。第95代的細胞系L使用毛細管法分離單細胞建立了clone929。檢測發(fā)現鼠痘病毒陰性。

NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Strain L](小鼠成纖維“一代”指從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間，與細胞世代或倍增不同。在一代中，細胞培增3～6次。細胞傳代后，一般經過三個階段：游離期、指數增生期和停止期。常用細胞分裂指數表示細胞增殖的旺盛程度，即細胞群的分裂相數／100個細胞。一般細胞分裂指數介于0.2％～0.5％，腫瘤細胞可達3～5％。接種2～3天分裂增殖旺盛，是活力時期，稱指數增生期(對數生長期)，適宜進行各種試驗。

formazan結晶的生成量僅與活NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Strain L](小鼠成纖維數目成正比（死細胞中琥珀酸脫氫酶消失，不能將MTT還原）。還原生成的formazan結晶可在含50%的N,N-二甲基甲酰胺和20%的十二甲基磺酸鈉（pH 4.7）的MTT溶解液中溶解，利用酶標儀測定490 nm處的光密度OD值，以反映出活細胞數目。也可以用DMSO來溶解。MTT粉末和溶液保存時都需要避光，用鋁箔紙包好就可以。實驗的時候一般關閉超凈臺上的日光燈來避光，覺得這樣比較好。

1.接種：用含10％胎小牛血清得培養(yǎng)液配成單個細胞懸液，以每孔1000－10000個接種到96孔板，每孔體積200ul.

2.NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Strain L](小鼠成纖維培養(yǎng)：同一般培養(yǎng)條件，培養(yǎng)3－5天（可根據試驗目的和要求決定培養(yǎng)時間）。

3.呈色：培養(yǎng)3－5天后，每孔加MTT溶液（5mg/ml用PBS 配)20ul.

繼續(xù)孵育4小時，終止培養(yǎng)，小心吸棄孔內培養(yǎng)上清液，對于懸浮需要離心后再吸棄孔內培養(yǎng)上清液。每孔加150ul DMSO，振蕩10分鐘，使結晶物充分融解。

4.比色：選擇490nm波長，在酶聯免疫監(jiān)測儀上測定各孔光吸收值，記錄結果，以時間為橫坐標，吸光值為縱坐標繪制NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Strain L](小鼠成纖維生長曲線。

KP-N-NS人腎上腺神經母細胞瘤細胞(腦轉移)

KU812人外周血嗜堿性白血病細胞

KURAMOCHI人卵巢癌細胞

kyse-140人食管癌細胞

Kyse450人食管癌細胞

KYSE-510人食管癌細胞

L78人肺腺鱗癌細胞

LAX人肺腺癌

LECPα-1人肺癌細胞

Li-7人肝癌細胞

lncap人前列腺癌細胞

LNCaP clone FGC人前列腺癌細胞

LoVo人結腸癌細胞